COVID-19: no podemos vivir en un mundo sin vacunas

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Publicado: 21/04/20 15:17 Categorías: Biología molecular

Acelera la producción de la vacuna frente a COVID-19 con las herramientas más innovadoras

La reciente aparición de SARS-CoV-2 (COVID-19), ha llevado a la urgente necesidad de desarrollar rápidamente una vacuna contra este nuevo coronavirus. Desde Condalab te ofrecemos una variedad de tecnologías innovadoras para apoyar a la investigación en sus esfuerzos por desarrollar rápidamente una vacuna adecuada, utilizando flujos de trabajo de vacunación inversa:

1. SECUENCIACIÓN VIRUS Y HOSPEDADOR

La secuenciación del genoma completo del virus SARS-CoV-2 puede proporcionar información de gran utilidad para el uso potencial de epítopos antigénicos que puedan llegar a desencadenar una respuesta inmune. De hecho, el SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian fue el que empleó China para secuenciar este nuevo coronavirus y proporcionar la secuencia completa del genoma viral.

Además, conocer el perfil inmunológico BRC y TCR, por RNA-seq, de pacientes infectados o individuos recuperados, puede proporcionar información adicional para impulsar aún más el proceso de identificación de antígenos y vacunas. Nuestros kits SMARTer BCR y TCR para humanos son altamente sensibles y se pueden utilizar para identificar estos cambios en los clonotipos BCR-TCR.

Para la automatización, en caso de manejo de muestras a niveles High-Throughput, el SMARTer TCR a nivel de célula única ha sido adaptado para el sistema single-cell ICELL8®.

2. ANÁLISIS BIOINFORMÁTICO

Para revelar antígenos SARS-CoV-2 y seleccionar los posibles objetivos de la vacuna (receptores de superficie vírica).

3. CLONAJE DE LAS DIANA PARA LA VACUNA

Los investigadores pueden acelerar la generación de construcciones de receptores y vacunas virales, incluido el clonaje, utilizando la tecnología In-Fusion® HD Cloning:

Altamente eficiente: >95% para fragmentos entre 0.5-15 kb
Independiente de la secuencia: cualquier inserto, en cualquier vector, en cualquier localización
Sin bases adicionales: únicamente la construcción de interés
Versátil: clonaje múltiple y mutagénesis dirigida en un único paso.

4. EXPRESIÓN Y PURIFICACION DE LAS DIANAS

Purificación de las proteínas candidatas a vacuna marcadas con His, utilizando las resinas de ABT (Agarose Bead Technologies).

5. INMUNIZACIÓN DE LOS RATONES

Los SMARTer Mouse BCR y TCR profiling Kits se pueden emplear para acelerar el proceso de detección de suero inmune para la actividad antiviral de las vacunas. Los candidatos a vacunas prometedores se optimizan aún más antes de entrar en ensayos clínicos.

6. ENSAYOS CLÍNICOS

La monitorización de la respuesta inmune es clave para evaluar la eficacia de los candidatos finales a vacuna. El perfil del repertorio inmune, BCR y TCR, por NGS permite una monitorización precisa de los cambios en los clonotipos y la identificación de clonotipos específicos.

Además, puede emplearse el sistema single-cell ICELL8® junto con el SMARTer® Human scTCR a/b Profiling Kit, para automatizar el proceso y realizar análisis del perfil TCR a nivel de célula única.

Referencia	Descripción	Formato
638909	In-Fusion® HD Cloning Plus	10 Rxns
638910	In-Fusion® HD Cloning Plus	50 Rxns
638911	In-Fusion® HD Cloning Plus	100 Rxns
638920	In-Fusion® HD Cloning Plus	96 Rxns
639650	In-Fusion® HD Cloning Kit	100 rxns
638933	In-Fusion® HD Cloning Kit	500 Rxns
639691	In-Fusion® HD EcoDry™ Cloning Kit	96 rxns
635710	Capturem™ His-Tagged Purification Miniprep Kit	20 Rxns
635713	Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Kit	6 Purifications
635714	Capturem™ His-Tagged Purification 96	96 Purifications
635730	Capturem™ His-Tagged Purification 24-Well Plate	1 Plate
635724	Capturem™ His-Tagged Purification Large Volume	4 Units
634466	SMARTer® Human BCR IgG IgM H/K/L Profiling Kit	12 Rxns
634467	SMARTer® Human BCR IgG IgM H/K/L Profiling Kit	48 Rxns
635014	SMARTer® Human TCR a/b Profiling Kit	12 Rxns
635015	SMARTer® Human TCR a/b Profiling Kit	48 Rxns
635016	SMARTer® Human TCR a/b Profiling Kit	96 Rxns
634431	SMARTer® Human scTCR a/b Profiling Kit	96 Rxns
634432	SMARTer® Human scTCR a/b Profiling Kit	480 Rxns
634422	SMARTer® Mouse BCR IgG H/K/L Profiling Kit	12 Rxns
634423	SMARTer® Mouse BCR IgG H/K/L Profiling Kit	48 Rxns
634424	SMARTer® Mouse BCR IgG H/K/L Profiling Kit	96 Rxns
634403	SMARTer® Mouse TCR a/b Profiling Kit	48 Rxns
634404	SMARTer® Mouse TCR a/b Profiling Kit	96 Rxns
640179	ICELL8® Human TCR a/b Profiling - Indexing Primer Set	1 Chip
640180	ICELL8® Human TCR a/b Profiling - Indexing Primer Set	5 Chips
640181	ICELL8® Human TCR a/b Profiling - Indexing Primer Set	10 Chips
640188	ICELL8® cx Single-Cell System	Each

Consulta además nuestros servicios si necesitas fragmentos largos para clonarlo directamente o si quieres el constructo completo sin necesidad de pasos de clonaje.

Bibliografía:

Publicaciones en las que han empleado la tecnología In-Fusion para estudiar y desarrollar vacunas contra los coronavirus, incluido el SARS-CoV-2:

· Letko, M. et al., Functional assessment of cell entry and receptor usage for SARS-CoV-2 and other lineage B betacoronaviruses. Nat Microbiol 5, 562–569 (2020).

· Kato H. et al., Development of a recombinant replication-deficient rabies virus-based bivalent-vaccine against MERS-CoV and rabies virus and its humoral immunogenicity in mice. PLoS ONE 14(10): e0223684. (2019)

· Terada Y. et al., MERS coronavirus nsp1 participates in an efficient propagation through a specific interaction with viral RNA. Virology 511:95-105. (2017)

Publicaciones en las que han utilizado la tecnología Capturem His para el desarrollo de la vacuna:

· Do V.T. et al. Recombinant adenovirus carrying a core neutralizing epitope of porcine epidemic diarrhea virus and heat-labile enterotoxin B of Escherichia coli as a mucosal vaccine. Arch Virol 165, 609–618 (2020)

· Martínez-Hernández S.L. et al. An anti-amoebic vaccine: generation of the recombinant antigen LC3 from Entamoeba histolytica linked to mutated exotoxin A (PEΔIII) via the Pichia pastoris system. Biotechnol Lett 39, 1149–1157 (2017).