Si empleas técnicas como el High Resolution Melting para analizar polimorfismos

Publicado: 08/04/22 10:14 Categorías: Biología molecular

El High Resolution Melting es una técnica de biología molecular relativamente reciente, que consiste en un análisis post-PCR donde se analizan pequeñas diferencias en las curvas de melting de las muestras para la detección de variaciones en la secuencia de ácidos nucleicos.  

 

Sus principales aplicaciones están relacionadas con el genotipado, estudios de metilación y epigenética, detección y análisis de mutaciones, identificación de especies, detección de polimorfismos e incluso descubrimiento de SNPs de novo en muestras de DNA bicatenario. 

 

¿Qué necesitamos para emplear esta técnica? 

 

  • Binding dyes de DNA de doble cadena 

  • Instrumento de PCR a tiempo de real con control de rampa de temperatura  

  • Software de análisis específico 

 

¿Qué podemos ofrecerte desde Condalab? 

 

   Tenemos dos opciones que presentarte:  

 

  1. El TB Green® Premix Ex Taq™ II (Tli RNase H Plus) (RR820A) para el cual puedes consultar la siguiente solicitud de patente para esta aplicación: https://patents.google.com/patent/JP6300452B2/en  

  2.  

“SYBR (Registered Trademark) II Prix using a template solution (20x primer) having AA, AG, and GG allele included in Melt Doctor HRM Positive Control Kit (Applied Biosystems) and primer mixture (20x primer) In addition to the standard reaction solution composition of (Tli RNase H Plus) (manufactured by Takara Bio Inc.), various surfactants were added, and HRM analysis was performed using a reaction solution to which SYBR (registered trademark) Green I was further added. . As a PCR reaction solution, for each template, 1 × concentration template, 1 × concentration primer mixed solution, 1 × SYBR (registered trademark) Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus), SYBR (registered trademark) corresponding to 0.75 × concentration. Green I (6x SYBR® Green I used 2.5 μL per-20 μL reaction)), 0.9% Triton® X-100, Tween® 20, or Nonidet® A total of 12 types of 25 μL reaction solutions containing P-40 or 1.2% PNSE were prepared on ice.”  

 

A continuación, encontrarás también un listado de publicaciones en las que se ha utilizado el Ex Taq para experimentos de HRM:  

 

Otra opción sería emplear la BlasTaq™ 2X qPCR MasterMix (G891) que está formulada con BrightGreen.  

 

Si quieres validar tus experimentos de HRM con nuestras enzimas, no dudes en solicitarnos una muestra a través del siguientes formulario de contacto.